Количественный пцр

Содержание

Количественный анализ ПЦР направлен на определение концентрации

Количественный пцр

Метод полимеразной цепной реакции (ПЦР) сегодня является одним из самых эффективных диагностических методов.

Он дает наиболее точные и достоверные результаты.

Материалом исследования служат:

С помощью ПЦР осуществляется диагностика даже скрытые инфекции, в частности, передающиеся половым путем.

Суть такого анализа заключается в обнаружении в исследуемом материале генома возбудителя путем многократного синтеза молекул его ДНК.

С помощью ПЦР можно диагностировать бактериальные, вирусные, протозойные и грибковые инфекции.

Максимальная погрешность при таком исследовании не превышает 5%.

Кроме того, его результаты можно получить уже в день сдачи анализов.

Существуют две разновидности анализа методом ПЦР:

Качественный метод выполняется с целью обнаружения в биоматериале возбудителя болезни.

Количественный анализ ПЦР

Полимеразная цепная реакция – метод лабораторной диагностики.

ПЦР тест широко применим в медицине.

Это связано с его высокой точностью.

В основе методики определение ДНК микроорганизмов.

Проводят ПЦР диагностику, как правило, в условиях лаборатории.

Когда необходим количественный анализ ПЦР мазков и крови

Этот метод применяют в урологии, гинекологии, венерологии.

Чаще всего он необходим для постановки диагноза.

При помощи ПЦР тестировании можно обнаружить такие заболевания как:

  • Гонорея
  • Сифилис
  • Уреаплазмоз
  • Хламидиоз
  • Трихомониаз
  • Вирус папилломы человека.

Данный метод используют и при заготовке донорской крови.

Он позволяет избежать риска переливания инфицированной крови.

Количественный анализ ПЦР направлен на определение концентрации возбудителя в организме, т.е. оценку степени «заразности» больного.

Количественный ПЦР является незаменимым методом лабораторной диагностики вирусного гепатита С.

С его помощью определяют содержание в крови больного РНК вируса, выражая его в МЕ (международных единицах) или копий на 1 мл.

В тех случаях, когда гепатит С уже диагностирован, количественный анализ ПЦР выполняют по следующей схеме:

Нужно ли каким-то образом готовиться к количественному ПЦР анализу?

Нет, специальная подготовка в этом случае не нужна.

Единственным условием является воздержание от курения за 30 минут до сдачи крови.

ПЦР количественный: гепатит С

Гепатит С – инфекционное заболевание, поражающее преимущественно печень.

Инфекция проникает через кровь.

Для того чтобы выявить возбудителя этой болезни применяют количественный ПЦР тест.

Он определяет концентрацию возбудителя в крови больного.

Чтобы определить степень заболевания, делают РНК гепатит С количественно.

Чаще всего ПЦР гепатита С делают после того, как обнаружили соответствующие антитела.

После этого тест делают на 4, 12, 24 неделю и далее через год.

Результаты количественного анализа ПЦР при диагностике гепатита С

Сдать правильно материал для анализа ПЦР это важно.

Тем не менее, нужно уметь правильно расшифровать полученные результаты.

Как интерпретируют результаты количественного анализа ПЦР при диагностике гепатита С и определении эффективности его лечения?

Стоит отметить, что вирус гепатита С обладает чрезвычайной разнородностью, устойчивостью во внешней среде.

При его низкой концентрации в крови передача его вертикальным путем или через половой контакт маловероятна.

Инфицирование и заболевание в таких случаях чаще происходит у людей с ослабленным иммунитетом.

Или сопутствующими инфекционными заболеваниями мочеполовых путей (ВИЧ, половые инфекции).

Bенеролога, пройти количественный анализ ПЦР

Помните! Расшифровать полученные данные должен только врач.

Возможно получение ложного результата.

Это зависит от того как материал транспортировался, рабочее место где делался забор крови для исследования, нарушение технологии выполнения анализа.

Поэтому следует уделить максимум внимания при выборе лаборатории.

Мазок ПЦР количественный на хламидии

Перед тем как сдать анализ ПЦР на эту инфекцию следует знать, как правильно подготовится к анализу.

Внимание! У женщин не берут материал во время менструального цикла.

Мазок следует сдавать только при соблюдении определенных правил:

  • Не использовать вагинальные свечи перед исследованием
  • Отказаться на время анализа от половых контактов
  • За две недели до исследований отметить антибиотики

Мазок у женщин берут из влагалища.

Мужчинам делают соскоб с мочеиспускательного канала.

Забор материала осуществляется специальным стерильным зондом, после чего помещается в стерильную пробирку.

Полученный результат может быть:

  • Отрицательный – инфекция в биоматериале отсутствует;
  • Положительный – в мазке присутствуют хламидии.

Количественный ПЦР анализ: ВПЧ 21 тип

С помощью такого метода можно сразу определить тип вируса.

Данный вид ВПЧ относится к распространенным.

ВПЧ существует более 100 видов.

Большая часть из них поражает кожные покровы, остальные слизистые оболочки.

Выделяют виды, которые способны вызывать онкологические заболевания, такие как рак шейки матки.

Для анализа делают забор клеток эпителия с шейки матки.

Результаты могут быть следующими:

  • Риск не обнаружен 0–3 Lg (HPV/105)
  • Возможность появления дисплазии 3–5 Lg (HPV/105)
  • Большая вероятность дисплазии 5 и выше Lg (HPV/105)

ПЦР ДНК: обнаружено

Результат ПЦР анализа положительный – в биологическом материале пациента были обнаружены фрагменты ДНК микроорганизма.

Если вы получили такой результат, как можно скорее начните лечение.

Бывают случаи, что результат получается положительным, но при этом человек себя нормально чувствует, и признаков болезни нет.

Это может означать, что заболевание находится на начальной стадии.

В таком случае следует обратиться к врачу и приступить к лечению.

Внимание! Результат анализа не является диагнозом. Схему лечения должен назначать врач.

При необходимости, специалист назначит пройти повторные исследования,

К какому врачу обращаться для сдачи количественного анализа ПЦР

Для того что бы сделать количественный ПЦР анализ, необходимо обратится в клинику.

Современное лабораторное оборудование обеспечивает точность ПЦР анализа.

Сдать мазок можно при посещении врача венеролога.

Врач проведет осмотр и возьмет материал на исследование.

После получения результата специалист поможет вам расшифровать результат и назначит необходимый курс лечения.

Получить исчерпывающую консультацию опытного венеролога, пройти количественный анализ ПЦР, а также курс эффективной терапии вы сможете, обратившись в наш платный КВД.

Помните, что качественная и своевременная диагностика – залог успешности лечения и ваш шанс на выздоровление.

Источник: https://kvd-moskva.ru/analizy-na-infektsii/423/

Пцр количественный – зачем нужен и где сдать в москве

Количественный пцр

Полимеразная цепная реакция – современный метод идентификации возбудителей инфекционных заболеваний, в том числе, венерических патологий.

Методика по точности и специфичности оставила далеко за бортом микроскопию мазков и даже бактериологические посевы.

С ее помощью можно находить фрагменты ДНК или РНК самых разных инфекционных агентов: бактерий, вирусов, грибов, простейших.

При этом не путая между собой не только представителей разных классов, но даже и видов.

Данный способ амплификации нуклеиновых кислот позволил приблизить сроки установления диагноза любого венерического заболевания к моменту обращения человека к врачу.

Чувствительность ПЦР такова, что позволяет обнаружить даже остатки генетического материала искомого микроорганизма.

Диагностика может применяться сразу после заражения половой инфекцией.

Как выполняется ПЦР анализ

Для выполнения анализа требуется забрать образец биологического материала.

Это выполняется врачом на приеме (возможно в день обращения).

В качестве исследуемого материала годятся кровь, отделяемое кожных высыпаний, соскобы эндотелия уретры, мазки цервикального канала, влагалища, прямой кишки, соскоб или мазок с конъюнктивы, спинномозговая жидкость, моча, сперма, простатический секрет.

Считается, что для выполнения исследования максимально точно, не достаточно воспользоваться только венозной кровью. Желательно, чтобы образец для анализа был забран из участка, где инфекционный агент вызвал воспалительные изменения.

Чтобы гарантировать чистоту образца и избежать его загрязнения посторонними микробными примесями, забор материала нужно проводить в клинике.

В исследовании пользуются амплификатором – прибором, который периодически способен в заданном режиме периодично нагревать и охлаждать пробирки с образцами биоматериала.

Для того чтобы реакции текли быстрее, добавляют ферменты.

  • Первый этап предполагает расщепление двойной цепочки ДНК инфекционного агента.
  • Далее на короткий участок ДНК садятся две затравки (праймера) уникальные для данного вида возбудителя с образованием гибрида. Для этого требуется повышение температуры.
  • Затем участки ДНК возбудителя удваиваются и выделяются с помощью электрофореза.
  • После этого участки выявляют, изучают и идентифицируют.

Это незаменимая методика для тех возбудителей, которые умеют ускользать от серодиагностики крови или не растут на питательных средах.

ПЦР: качество или количество?

Количественный вариант полимеразной цепной реакции – разновидность амплификации нуклеиновых кислот.

Это способ, которым не только фиксируют присутствие нуклеотидов возбудителя, но и могут провести численный подсчет фрагментов неуклеиновых кислот.

Для проведения анализа задействуют “зонды”.

Так называют маркеры ДНК (олигонуклеотиды), позволяющие подсчитать полученный в результате анализа продукт.

Копии ДНК считаются по завершении каждого цикла амплификации.

Зонд может заменяться на флуорисцирующий краситель, который более ярко светится на помеченных участках удваивающихся ДНК.

Чем больше циклов удвоения ДНК, тем сильнее свечение.

Это позволяет судить о начальном количестве генного материала.

Просто по замеру сигнала сделать это сложно.

Поэтому пользуются методами нормировки.

Для этого сравнивают подсчитанное количество молекул в образце, имеющем заведомо известное количество молекул, и изучаемом образце.

Окончательный результат рассчитывают по формуле.

Метод также называется ПЦР в реальном времени.

Его нередко сочетают с ПЦР обратной транскрипции, считая небольшие количества мРНК.

Актуален метод количественной ПЦР далеко не всегда.

Для большого числа бактериальных инфекций (уреаплазмоза, микоплазмоза) концентрация возбудителя не так важна, как сам факт его обнаружения и типирования.

Так, например, для Уреаплазмы уреалитикум сам факт выявления уже является достаточным для начала терапии.

В то время как Уреаплазма парвум в отсутствии клиники уретрита лечения не требует.

К тому же на фоне самых разных внешних факторов, включая начало специфической терапии, концентрация инфекционных агентов может меняться чуть ли не ежедневно.

Поэтому при диагностике урогенитальных инфекций ПЦР количественное определение плотности возбудителя не играет решающей роли при выборе тактики ведения пациента.

Поэтому же мазок ПЦР количественный на хламидии, микоплазмы, уреаплазмы, гарднереллу, кандиду обычно не выполняется, хотя и доступен.

Вполне достаточно бывает только качественной методикой засечь генетический материал возбудителя.

Хламидийная инфекция не требует количественной оценки, так как, если обнаруживается генетический материал возбудителя, стоит начинать терапию антимикробными препаратами.

Острая фаза инфекционного процесса может быть обнаружена при исследовании крови.

Подострое или хроническое течение – при обнаружении ДНК в соскобах эндотелия половых или мочевыводящих путей.

Когда ПЦР количественный важен

Более востребована методика в ситуациях, когда плотность генетических носителей важна для решения об эффективности терапии или для выстраивания прогноза течения заболевания.

  • В частном случае определение количественное (ПЦР-анализ ВПЧ 21 тип) помогает сориентироваться, достаточно ли только местного лечения (например, лазерного удаления бородавки) или стоит подключать иммуностимуляторы.
  • Концентрации онкогенных папилломавирусов позволяют оценить риски развития карцином шейки матки или полового члена.
  • Степень инфекции важно оценить при герпесе. Частота рецидивов зависит от числа инфицированных нервных узлов.
  • ПЦР количественный на гепатит С и В также широко используется. Проводится не только выявление вирусов.  Особо важный момент – оценка эффективности лечения с помощью ПЦР-анализ крови к ВИЧ и гепатитам.
  • Также методикой пользуются для обнаружения элементов опухолей из плотных тканей и циркулирующих метастатических клеток (например, при раке молочной железы).

Пцр количественный на вич

Во время гемотеста ПЦР ДНК ВИЧ ищется собственно вирус, поэтому нет необходимости ждать, пока в крови накопятся иммунные антитела.

Назначать исследование можно, спустя 10-14 дней от вероятного заражения.

Также такой анализ незаменим для детей от инфицированных матерей.

Количественное определение РНК ВИЧ и необходимость для лечения установления концентрации вируса – очень важный момент.

Для ВИЧ-инфицированных количество вируса важно для начала противовирусной терапии и оценки ее эффективности.

Если количество резко уменьшается, то лечение можно считать успешным.

Также количественный анализ позволяет составлять прогноз для пациента и вести мониторинг течения болезни.

Высокие титры РНК вирус при отсутствии антител (ИФА) позволяют диагностировать острую ВИЧ-инфекцию.

Но требуется повторное диагностирование методикой ИФА через 1 и 3 месяца.

У беременных с ВИЧ количественный тест на РНК проводится за три-четыре недели до родов с целью выбрать способ родоразрешения (кесарево сечение или естественные роды).

Сроки выполнения такого исследования – 2-3 дня.

Он не годится в качестве скренига на ВИЧ. Назначается только по показаниям врачом.

Как читается количественный ПЦР анализ на ВИЧ

Количественный РНК-тест на ВИЧ возможен для ВИЧ-1.

Анализ показывает высокую чувствительность: 20 копий в миллилитре и сто процентную специфичность.

  • От 20 до 10 миллионов копий в миллилитре укладываются в достоверный результат.
  • Если РНК не выявлена или ее количество ниже порога чувствительности теста, то ставят отметку “не обнаружено”.
  • > 10 000000 повторений – HIV1 рибонуклеиновая кислота имеется в запредельной концентрации.

Как готовиться к количественным исследованиям ПЦР

Специальная подготовка пациента к исследованию мазков и крови довольно проста.

Достаточно выполнить несколько элементарных рекомендаций.

  • Не принимать антибиотики две недели. Также нежелательно употреблять противовирусные и противопротозойные лекарственные средства.
  • Нельзя применять местные антисептики, в том числе, в средствах для интимной гигиены.
  • Перед забором материала из уретры не следует мочиться на протяжении двух часов.
  • Если планируется исследовать сперму, две суток не показан секс.
  • Забор венозной крови проводится натощак.

Как собирают образцы:

  • У мужчин образцы мазков и соскобов эндотелия из уретры выполняет венерологи ил уролог. Используется урологический зонд, который водится на глубину 3-4 сантиметра и извлекается с легким нажатием на стенку мочеиспускательного канала. Материал помещается в специальную пробирку и доставляется в лабораторию.
  • У женщин пробы забираются во время осмотра на кресле. Сначала из мочеиспускательного канала (петлей из пластика, тампоном, погружаемым на глубину 2 сантиметра и извлекаемым с легким нажимом). Затем влагалищное отделяемое собирают стерильным ватным тампоном, ориентируясь на воспалительно измененные участки или задний влагалищный свод. Для цервикального канала предусмотрен тампон-щеточка или ватный тампон.
  • Сперма и моча собираются в лаборатории пациентом в стерильную лабораторную посуду.
  • Мазки из ротоглотки, отделяемое конъюнктивы, мазки из прямой кишки выполняет средний медперсонал во время приема.
  • Простатический секрет после массажа простаты на приеме у уролога.

ПЦР количественный готовится для мазков в течение одних суток, для образцов крови – 2-3 дня.

Интерпретация количественного ПЦР мазков и крови

Чаще всего пользуются количественной вариацией полимеразной цепной реакции для диагностики вирусных инфекций по анализу крови.

Применить методику в случаях гепатита С возможно и рационально, если положителен ранее проводившийся качественный анализ на РНК в сыворотке крови.

Также метод годится, когда надо определить вирусную нагрузку, выбрать тактику ведения пациента, точно оценить результаты терапии.

  • Если РНК не нашли или концентрация ее ниже порога чувствительности теста, то делают отметку “не обнаружено”.
  • 108 ME на мл – ответ положительный, концентрация вируса более 108.

ДНК папилломавирусов также определяют количественно.

Анализ служит для верификации 14 разновидностей вирусов с разной онкогенностью.

В качестве материала используются соскобы эндотелия урогенитального тракта.

Цель не только определить, какие из вирусов имеются у данного пациента (68, 66, 59, 58, 56, 52, 51, 45, 39, 35, 33, 31, 18 или 16 типов).

Анализ позволяет решить, нужна ли терапия данному человеку, и оценить его риски по развитию урогенитальных онкозаболеваний.

Так высокий онкогенный риск показывают вирусы 68, 59, 39, 33, 31, 18 и 16 типов.

У прочих вирусов риск онкогенности низкий или средний.

Высокие титры ДНК служат маркером прогрессирования инфекции и высоких рисков.

Резкое снижение тиров на фоне терапии говорит о благоприятном прогнозе.

Пометка на бланке анализа ПЦР «ДНК обнаружено» подтверждает наличие данного серотипа вируса папилломы человека в образце мазка или соскоба.

Данное исследование очень важно для женщин.

Так как для них папилломавирус – основная причина развития рака шейки матки, который одновременно является самой частой причиной инвалидности и смертности у молодых женщин.

Детекция в реальном времени дезоксирибонуклеиновой кислоты вирусов герпеса 1 и 2 типа возможна в соскобах эндотелия урогенитального тракта.

Показана она не только при наличии клиники герпетических поражений в области гениталий.

Но и как скрининг перед планированием беременности и для дифференциальной диагностики венерических заболеваний.

Дополнительные бонусы количественной методики ПЦР

Как и другие исследования, количественная амплификация нуклеотидов очень хороша, если назначать ее в подходящей ситуации и по показаниям.

  • Не требуется значительного промежутка времени от заражения до накопления исследуемого материала, как например, при серологической диагностике крови (например, антител при ИФА). Качественный метод, как и количественная ПЦР могут реагировать на присутствие даже очень небольших фрагментов ДНК или РНК возбудителей. Просто в разные периоды болезни количество выявленных фрагментов генома инфекционного агента будет различным.
  • Укорочение сроков диагностического поиска (от суток для мазков и до двух-трех дней для крови) позволяет при необходимости незамедлительно начать специфическое лечение любого вида венерического заболевания.
  • Погрешности методики в основном связаны с загрязнением образцов посторонними микробными агентами. Этого можно избежать, если забор материала для исследования проводится в условиях клиники опытным специалистом.
  • Выбирая современную клинику, пациент сможет оградить себя от погрешностей диагностики, связанной с недостаточным качеством оборудования или расходных материалов.

Пцр количественный: куда обратиться

Если возникает потребность в количественном анализе ПЦР на любую инфекцию, требуется лечение половой инфекции или его контроль, смело можно обращаться к специалистам нашей клиники.

Существует целый ряд ситуаций, когда только количественной вариацией полимеразной цепной реакции можно удовлетворить требованиям диагностического поиска.

Большинство вирусных инфекций, передаваемых половым путем для уточнения стадии, начала лечения, оценке его пользы требуют именно этого исследования.

И качественный, и количественный ПЦР-тест крови, мазков или соскобов можно выполнить в нашей клинике.

Весь процесс от забора материала до оценки результата и назначения лечения можно пройти в одной клинике.

Репутация, которую мы завоевали на рынке медицинских услуг, – это результат слаженного труда коллектива профессионалов.

Пациенты чувствуют это даже на этапе первого обращения или записи на консультацию.

У нас все этапы диагностики выполняются безболезненно и качественно в самые короткие сроки.

Обратившись в нашу клинику, вы гарантированно получаете точные результаты диагностики и самые современные методики лечения.

Для сдачи анализа ПЦР количественныйобращайтесь к автору этой статьи – венерологу в Москве с многолетним опытом работы.

Источник: http://www.venerologia.ru/content/%D0%BF%D1%86%D1%80-%D0%BA%D0%BE%D0%BB%D0%B8%D1%87%D0%B5%D1%81%D1%82%D0%B2%D0%B5%D0%BD%D0%BD%D1%8B%D0%B9-%D0%B0%D0%BD%D0%B0%D0%BB%D0%B8%D0%B7

Количественное определение РНК вируса гепатита С (HCV) методом ПЦР

Количественный пцр

Гепатит С часто протекает скрыто, без очевидных клинических проявлений. Чтобы определить наличие вируса в организме и поражение им печени требуется пройти соответствующее исследование — ПЦР количественный на гепатит С.

Что такое количественный ПЦР?

Количественный ПЦР — исследование крови или другой физиологической жидкости, которое позволяет определить количественную вирусную нагрузку на организм.

Заболевания, в зависимости от тяжести протекания, отражаются присутствием в крови определённого количества (мл на 1 см3) возбудителя инфекции. Каждый живой организм имеет в своём составе белки, рибонуклеиновую (РНК) и дезоксирибонуклеиновую (ДНК) кислоты.

Каждый вирус имеет характерные только для него РНК, ДНК, белки. Суть метода полимеразной цепной реакции в том, что он указывает количество РНК конкретного организма (например, вируса определённого генотипа) в 1 мл жидкости. Таким образом, выясняется степень и тяжесть заболевания.

При гепатите С, количественный ПЦР показывает сколько в исследуемом материале РНК вируса. Предварительно проводят качественный анализ, выясняя его наличие.

Из всех существующих способов определения возбудителя, а также его количества, полимеразная цепная реакция — наиболее точный метод. Он призван обнаружить сам вредоносный организм, а не последствия его пребывания (антитела).

Когда и кому необходимо сдавать количественный ПЦР на гепатит С?

Терапия любого заболевания допустима только после установления точного диагноза. Врач сбирает анамнез, оценивает клинические проявления недомогания, а также назначает дополнительные лабораторные обследования.

Прежде чем доктор поставит диагноз, подберёт лечение, необходимо количественное определение РНК вируса гепатита С. Этот анализ назначается не всем пациентам, а при конкретных показаниях:

  • контакт с больным гепатитом С;
  • симптомы заболевания печени;
  • клинические проявления цирроза;
  • в биохимическом анализе крови показатели активности АЛТ, АСТ выше нормы;
  • подозрение на инфицирование гепатитом С;
  • выявлены антитела к HCV при иммуноферментном исследовании крови;
  • уточнение диагноза;
  • определение вирусной нагрузки, чтобы доктор мог выбрать тактику, правильно составить схему лечения;
  • контроль эффективности проводимой терапии в динамике (1, 4, 12, 24 недели после начала лечения);
  • динамика протекания заболевания;
  • при подозрении на смешанные поражения железы;
  • по окончании лечения гепатита для периодической проверки, чтобы исключить рецидив.

Как проходит обследование?

Чтобы сделать количественный ПЦР вирусной РНК гепатита С, надо соблюдать методику выполнения исследования:

  1. Лучше всего для тестирования подходит венозная кровь. Анализы сдаются натощак. Пациенту не рекомендуют есть жирную и жареную пищу, пить спиртное за два дня до манипуляции.
  2. После забора биологического материала, его доставляют в лабораторию, обрабатывают.
  3. ПЦР состоит из трёх этапов (подготовка, увеличение копий ДНК возбудителя, идентификация) на каждом из которых используется определённое оборудование и реактивы.
  4. Образцы, взятые для исследования, маркируются. Из них с помощью реагентов выделяют РНК вируса, обозначенного качественным ПЦР.
  5. Процесс амплификации (создание и увеличение копий) проходит несколько раз посредством изменения температуры материала (нагревания, охлаждения) с использованием реактивов.
  6. На последнем этапе происходит определение вирусной нагрузки. Результат исследования интерпретирует лечащий врач, у которого есть расшифровка, таблица значений и итоги предварительной диагностики.

:  Какие бывают антитела к вирусу гепатита С и их значение?

Расшифровка результатов (таблица)

После количественной полимеразной цепной реакции, данные о вирусной нагрузке на печень и организм в целом отображают в бланке. Количество РНК возбудителя выражается как МЕ/мл (международные единицы/миллилитры). Данные обычно выводятся в виде таблицы, в которой представлены:

  • норма количественного ПЦР при гепатит С;
  • полученный результат;
  • другие параметры.

Значения показателей вирусной нагрузки при гепатите С

ПоказательИнтерпретация
ОтрицательныйРНК возбудителя в биологическом материале не обнаружено
0 — 1,8Х102МЕ/млКоличество генетического материала вируса ниже установленного референтного значения
1,8Х102МЕ/мл — 8Х105МЕ/млНевысокая вирусная нагрузка.
8Х105МЕ/мл — 2,4Х107МЕ/млВысокая вирусная нагрузка
2,4Х107МЕ/мл и болееПревышена верхняя граница значений.

Показатели отчасти зависят от типа и чувствительности теста. Поэтому расшифровать результат анализа может только доктор, который учитывает все параметры.

Лечащий врач, исходя из результатов анализов, собранного анамнеза, клинических признаков подберёт противовирусную терапию. Интенсивность её будет зависеть от количества найденного генотипа вируса в образце.

Возможны ли ошибки при количественном ПЦР на гепатит С?

Любое лабораторное исследование может иметь погрешность, если не будут соблюдены условия его проведения на всех этапах (от подготовки к процедуре до интерпретации результатов).

Количественная полимеразная цепная реакция – один из наиболее достоверных методов определения вирусной нагрузки.

Но при нарушении методики она может давать ошибочные результаты, так как присутствует человеческий фактор.

Чтобы максимально избежать ложноположительных или неверных данных, требуется выполнять все необходимые требования диагностики:
  1. Прежде чем проводить количественный ПЦР рекомендуется провести иммунологическое исследование крови на выявление антител к гепатиту С. Кроме этого, требуется определить генотип вируса.
  2. Пациенту важно подготовиться к сдаче анализов в соответствии с рекомендациями. Чтобы уменьшить вероятность ошибки в тесте, надо сообщить лаборанту о приёме лекарств (если такой момент имеет место). На прохождение ПЦР влияет употребление запрещённой пищи, стресс, вредные привычки, физические нагрузки, различные заболевания.
  3. Лаборант, который обрабатывает образец биологического материала должен быть компетентен, знать методику проведения количественного ПЦР, а также работу оборудования. Правильная идентификация, подсчёт копий – основа верного результата
  4. Качество, способ, сроки хранения реактивов должны соответствовать заявленным требованиям.
  5. Соблюдение температурного режима на всех этапах реакции обязательно.

:  Как заражаются гепатитом С: самые частые способы

Правила и рекомендации по подготовке, сбору материала, проведения количественного ПЦР необходимо соблюдать для достижения 100% точности полученного результата. Ошибочные данные приводят к неправильному выбору тактики лечения и неэффективности терапии.

Что делать, если наличие РНК вируса подтвердилось?

При подозрении на инфицирование гепатитом С надо обязательно проконсультироваться с врачом. Если проведена диагностика, а ПЦР положительная или её количественные показатели говорят о наличии вирусной нагрузки, это однозначно повод безотлагательно посетить медучреждение.

Доктор, расшифровав результаты анализов, назначит лечение. Правильно выбранные лекарства, техника терапии, своевременное начало приёма медикаментов помогут избежать патологических изменений структуры и работы печени.

Гепатит С — тяжёлое вирусное заболевание, которое может привести к необратимым последствиям для человека. Ранняя, точная диагностика (количественный ПЦР) даёт возможность увеличить вероятность выздоровления в несколько раз.

Источник: https://progepatity.ru/gepatit-c/kolichestvennoe-ptsr-pri-gepatite-c

Пцр количественный

Количественный пцр

ДНК ПЦР анализы направлены на выявление патогенных микроорганизмов. Они бывают количественные и качественные.

Если при ПЦР ДНК обнаружена или не выявлена, это качественный тест.

Если указывается ещё и концентрация, это количественная ПЦР. Данный анализ более информативен. Хотя требуется он далеко не всегда.

Когда необходим количественный ПЦР анализ

При ПЦР количественное определение требуется во многих случаях. Она дает дополнительные возможности, если сравнивать с качественным анализом.

Если после проведения ПЦР ДНК обнаружено, знать количество микроорганизмов необходимо, чтобы понять:

  • требуется ли пациенту лечение (при низких количественных показателях оно может не назначаться);
  • насколько быстро идет выздоровление (есть ли вирусологический ответ от лечения);
  • стоит ли продолжать терапию этими же препаратами или нужно менять схему;
  • болезнь находится под контролем или возникает рецидив, требующий дополнительных терапевтических мероприятий;
  • насколько высоким является риск осложнений (например, вероятность диспластических изменений в шейке матки при папилломавирусной инфекции).

Поговорим подробнее, при каких патологиях могут потребоваться количественные ДНК ПЦР анализы.

Пцр на микоплазмы, уреаплазмы, гарднереллу, кандиду

Существуют микроорганизмы, которые не всегда вызывают патологический процесс в структурах урогенитального тракта. Они могут вызывать воспалительные или другие симптомы только в том случае, когда популяция бактерий значительно увеличится.

Чтобы узнать, увеличилась она или нет, требуются соответствующие анализы. Многие лаборатории предлагают комплексный количественный анализ ПЦР сразу на несколько возбудителей.

Микоплазмы двух видов могут вызывать воспалительные процессы во влагалище. Это микоплазма гениталиум и хоминис. Причем, гениталиум может вызывать воспаление даже в минимальных концентрациях.

Этот микроорганизм рассматривается как однозначно патогенный.  При его выявлении даже в малых количествах проводится лечение. Целью его считается эрадикация возбудителя.

Критерием успешности терапии является отрицательный анализ ПЦР на микоплазму гениталиум.

А вот хоминис – менее опасный вид данных микроорганизмов. Он может обнаруживаться в урогенитальном тракте многих людей. В том числе тех, кто не имеет признаков воспалительного процесса в урогенитальном тракте. В этом случае пороговой считается концентрация бактерий в клиническом материале от 104 копий ДНК в мл.

Если ПЦР покажет, что бактерий меньше, лечение может и не назначаться. Но если количество патогенов превышает указанное значение, требуется антибактериальная терапия.

Потому что в больших количествах микоплазмы:

  • вызывают воспаление;
  • могут провоцировать осложнения;
  • передаются при половом акте;
  • опасны для беременных.

Гарднереллы – вид транзитных микроорганизмов, которые часто выявляются в урогенитальном тракте женщин. Они не вызывают воспаления. Но в больших количествах провоцируют дисбактериоз. Это заболевание, основным проявлением которого является обильное отделяемое из влагалища с неприятным запахом.

Патология нарушает качество половой жизни. Гарднереллы в больших количествах способны быстро уничтожать лактобактерий. Они вытесняют их. В итоге может оказаться так, что лактобактерии вообще не обнаруживаются во влагалище. Этого не должно случиться, потому что молочнокислые бактерии защищают организм женщины от других микробов. Они делают это за счет продукции молочной кислоты.

Кислая рН влагалища не дает условно-патогенным бактериям чрезмерно развиваться.

Количественная ПЦР ДНК диагностика на гарднереллы показывает, сколько этих микроорганизмов содержится во влагалище. Если их больше 104 копий ДНК в мл, требуется антибактериальное лечение. Оно позволяет предотвратить дисбактериоз влагалища или устранить его основные проявления, если они уже присутствуют.

Кандиды – ещё одна группа микроорганизмов, для которых имеет значение количество. Это грибы, которые в норме присутствуют в урогенитальном тракте большинства людей.

Кандидоз является оппортунистической инфекцией. Он развивается, когда в организме ослаблен иммунитет. В этом случае количество кандид резко увеличивается. Появляются красные пятна, белые выделения и другие симптомы, иногда достаточно сильно выраженные.

Само по себе обнаружение кандиды с помощью ПЦР не дает врачу никакой ценной информации. Всем и так понятно, что эти грибы в структурах урогенитального тракта есть. Поэтому качественная ПЦР на кандидоз не проводится.

Клиническое значение имеет только количественный метод ПЦР. При определении кандид в количестве, превышающем пороговое значение, устанавливается диагноз кандидоз. Назначается соответствующее лечение.

Показанием для назначения количественного ПЦР на кандиды является в основном наличие симптомов кандидоза. Анализ также может быть использован в случае обнаружения псевдомицелия при микроскопии мазка из урогенитального тракта. ПЦР позволяет установить вид гриба.

Ведь кандидоз может быть вызван десятками видов микроорганизмов. Чаще всего это кандида альбиканс. Но есть ещё 5-6 видов грибов, которые провоцируют кандидоз достаточно часто. Причем, их наличие усложняет процесс лечения.

Часто такие кандидозы рецидивируют. Они плохо реагируют на традиционно используемые при кандидозе противогрибковые препараты.

Количественная ПЦР на кандидоз используется и после лечения. Она помогает врачу понять, была ли проведенная терапия успешной, и оценить риск рецидива грибкового заболевания в будущем.

Количественная ПЦР на уреаплазмоз тоже проводится достаточно часто. Уреаплазмы рассматриваются как условно-патогенная флора. То есть, они опасны только в больших количествах.

ПЦР количественная на уреаплазмы позволяет решить вопрос о необходимости лечения.

У многих врачей-венерологов целесообразность использования количественной ПЦР на уреаплазмы вызывает вопросы. Этот микроорганизм обладает очень высокой адгезивной способностью. Он крепко прилипает к клеткам, поэтому в клиническом материале может быть гораздо меньше бактерий, чем есть в организме.

Соответственно, количественные показатели могут быть заниженными. Кроме того, они значительно варьируют от анализа к анализу.

Хотя в настоящее время считается, что лечение стоит начинать только при концентрации бактерий от 104 копий ДНК в мл, нередко врачи назначают лечение и при меньшем их количестве. Особенно если женщина готовится к беременности.

Есть немало исследований, которые подтверждают: уреаплазма очень опасна для плода. Она вызывает инфицирование околоплодных оболочек.

Уреаплазма способна спровоцировать преждевременные роды. Она вызывает респираторные инфекции у новорожденного плода. Поэтому даже если качественная ПЦР показывает небольшие количества уреаплазм, желательно пролечиться тем женщинам, которые готовятся к беременности.

Не требуется лечение при сочетании таких факторов:

  • концентрация уреаплазм ниже пороговой;
  • нет симптомов воспаления;
  • супружеская пара не планирует беременность.

Тогда лечиться не обязательно. Но такие случаи встречаются редко. Потому что пациенты редко приходят на диагностику венерических заболеваний с профилактической целью. В основном они обращаются после возникновения воспалительных симптомов.

Мазок Пцр количественный на хламидии

На хламидии чаще проводят тест качественный, а не количественный.

Потому что этот микроорганизм является патогенным.

Одного только факта его обнаружения достаточно, чтобы начать лечение.

Причем, количество копий ДНК не играет существенной роли в определении схемы терапии и дозировок препаратов.

Тем не менее, количественные тесты иногда проводят.

Они дают врачу возможность оценить прогноз заболевания.

Понять, насколько высока вероятность осложнений.

А также спрогнозировать ответ на лечение.

При большой концентрации хламидий в урогенитальном тракте доктор может увеличить курс терапии.

Оценивая данный показатель в динамике, он может понять, работают ли те антибактериальные препараты, которые он назначил.

Количественный ПЦР анализ ВПЧ 21 тип

Такие исследования могут использоваться в диагностике папилломавирусной инфекции.

Почему нужны именно количественные анализы, а не качественные? Они более информативны в плане оценки прогноза заболевания, целесообразности противовирусного лечения и оценки его результативности.

Для первичной диагностики обычно проводят качественную ПЦР. Она помогает установить, какие типы ВПЧ присутствуют в организме. Это могут быть высокоонкогенные, среднеонкогенные или низкоонкогенные типы.

Особую настороженность вызывают вирусы высокой онкогенности. Поэтому не лишним будет знать, в каком количестве они содержатся в урогенитальном тракте.

Особенно важен данный анализ для женщин. Ведь у них ВПЧ является основной причиной рака шейки матки.

В свою очередь карцинома шейки матки – самое частое злокачественное онкологическое заболевание среди молодых женщин.

Проведение количественной ПЦР позволяет установить, прогрессирует или регрессирует патологический процесс. Если количество вирусов увеличивается, это говорит о высоком риске дисплазии шейки матки. А она в дальнейшем переходит в рак.

При длительно сохраняющиеся высокой вирусной нагрузке показано лечение с помощью иммуномодуляторов и противовирусных препаратов общего действия. В процессе лечения проводятся повторные исследования ПЦР.

Врач смотрит, стало вирусов в организме больше или меньше. Если их стало меньше, это хороший прогностический признак. Если же вирусов стало больше, то по результатам количественной ПЦР схему терапии стоит пересмотреть.

Количественное определение РНК ВИЧ и необходимость для лечения

Количественная ПЦР имеет важнейшее значение в диагностике и терапии ВИЧ.

В основном первичная диагностика заболевания проводится путем определения уровня антител в крови. Это метод намного дешевле, а результаты можно получить быстрее.

Но в некоторых случаях без ПЦР не обойтись. Метод позволяет обнаружить ДНК провируса или РНК вируса в крови.

В основном используют количественную ПЦР для выявления РНК. Это самый ранний маркер ВИЧ.  Анализ крови позволит диагностировать болезнь уже через несколько недель после заражения. А количественная оценка методом ПЦР имеет огромное значение в определении схемы терапии.

С помощью анализа оценивают эффективность лечения. Если вирусная нагрузка снижается до неопределяемой, это говорит о том, что терапия проходит успешно.

Антиретровирусные препараты работают. Но если она начинает возрастать, это свидетельствует о формировании резистентности к препаратам. Подобное нередко происходит через несколько лет после начала лечения.

В таком случае схему лечения приходится менять. Иначе количество иммунных клеток в крови начнет снижаться. Вследствие ухудшения иммунитета начнут присоединяться инфекции и возникать злокачественные новообразования.

Используется также выявление ДНК ВИЧ при помощи ПЦР. Метод более предпочтителен для обследования новорожденных детей. Потому что количество РНК в крови может уменьшаться, если мать получала антиретровирусную терапию. В результате в первые дни жизни ПЦР количественная на РНК вируса может быть ложноотрицательной.

Оценка результативности лечения с помощью ПЦР анализа крови к гепатитам

Количественный анализ ПЦР используется при гепатите C для определения уровня виремии.

Метод дает возможность подобрать оптимальную схему терапии. А также он дает возможность оценить, насколько эффективной является проводимая терапия.

Благодаря ПЦР вирус гепатита С определяется уже через 1 неделю с момента заражения. В дальнейшем метод применяется, чтобы понять, было ли специфическое лечение эффективным.

Результаты оцениваются по ряду критериев:

  • вирусологический;
  • биохимический;
  • морфологический.

Вирусологический контроль проводится при помощи ПЦР. Если РНК вируса гепатита С не выявляется, то терапия прошла успешно.

Если результаты остаются отрицательными в течение 6 месяцев, такой вирусологический ответ считается устойчивым.

Появление РНК вируса на фоне прекращения лечения говорит о рецидиве заболевания. В процессе проведения терапии с помощью количественного ПЦР оценивают динамику изменения концентрации вируса.

Оптимальным результатом считается исчезновение РНК в течение не более чем 4 недель противовирусного лечения. Такой вирусологический ответ называют ранним.

ПЦР также позволяет определить тип вируса гепатита. При разных типах назначаются разные схемы лечения. Количественные показатели при вирусном гепатите С оценивают через каждые 3 месяца терапии.

Интерпретация количественной ПЦР мазков и крови

Интерпретацией результатов занимается врач.

Единицей измерения количества патогенных микроорганизмов является концентрация ДНК или РНК в одном миллилитре клинического материала. Она обычно обозначается в 10, которая возведена в степень. Эта степень фактически означает количество нулей, которые следуют после единицы. Например, 104 – это 10 000 копий ДНК.

Для разных инфекций нормы отличаются. В каждом случае требуется индивидуальная расшифровка анализа, так как часто их ещё нужно сравнивать с проведенными ранее исследованиями.

Подготовка к количественному анализу ПЦР мазков и крови

Подготовки к сдаче крови не требуется.

А вот к сдаче мазка нужно приготовиться. Есть несколько ограничений, которых следует придерживаться.

Запрещено накануне сдачи анализа:

  • вести интимную жизнь – в течение 2 дней;
  • принимать антибактериальные препараты (за исключением случаев, когда они назначены врачом) – в течение 2 недель;
  • не мочиться – 3 часа;
  • женщинам – не спринцеваться и не пользоваться тампонами – 2 дня.

К какому врачу обратиться для пцр анализа

Чтобы сделать качественную ПЦР, обратитесь к доктору-венерологу. Специалисты данного профиля ведут прием в нашем медицинском центре. Они оценят, есть ли у вас показания к назначению данного анализа.

При необходимости вы сможете сдать кровь или мазки в день обращения. Результаты для большинства исследований получите на следующий день.

Для сдачи анализов методом ПЦРобращайтесь к автору этой статьи – венерологу в Москве с многолетним опытом работы.

Источник: https://onvenerolog.ru/zppp/pcr-kolichestvennyj.html

Особенности количественного анализа ПЦР

Количественный анализ ПЦР – это довольно сложная реакция. Изначально она применялась только в молекулярной биологии в научных целях. Только в последние несколько лет методика стала использоваться, чтобы ставить инфекционные и некоторые генетические диагнозы.

Суть количественного анализа полимеразной цепной реакции кажется довольно простой. В ходе реакции специальный прибор непрерывно регистрирует данные. Благодаря чему удается точно оценить количество тех или иных частиц ДНК в биологическом материале.

Метод количественной ПЦР коренных отличий от классического исследования этого типа, в принципе, не имеет. Пациент сдает мазок или кровь в обычном режиме. Но при этом сама реакция осуществляется под контролем специального регистратора.

То есть для пациента полимеразная цепная реакция для определения числа вирусов или других патогенных организмов не отличается от классического анализа именно в плане особенностей сдачи.

Особенностью подобного исследования является то, что саму реакцию в лаборатории завершают на довольно ранних этапах.

Это необходимо, чтобы предотвратить появление большого количества ПЦР-фрагментов, которые могут смазать результат.

Пцр количественный: когда рекомендуется проводить исследование

Многие пациенты задают своим лечащим врачам вопрос о том, когда необходим количественный анализ ПЦР мазков и крови. Часто ошибочно считается, что основная задача этого метода – поставить диагноз при отсутствии симптомов. Или в том случае, если инфекция сочетанная.

Соответственно, рекомендация сдать биологический материал может даваться пациентам со следующими жалобами:

  • проблемы с мочеиспусканием, начиная от задержки мочи и заканчивая жалобами на дискомфорт во время опорожнения мочевого пузыря;
  • появление каких-либо нестандартных выделений, имеющих особый цвет или запах;
  • болезненность во время сексуальных контактов;
  • наличие воспалительных реакций на кожных покровах и видимых слизистых оболочках;
  • появление в крови или естественных выделениях крови, гноя и др.

Однако количественное определение ПЦР гораздо чаще применяется не для постановки диагноза, а используется, когда диагноз уже известен.

Почему?

Дело в том, что этот метод способен дать врачу информацию о том, насколько интенсивно развивается болезнь. Эффективна ли выбранная терапия, нет ли у патогенов резистентности к используемым лекарственным средствам.

Поскольку эта информация важна для проведения терапии, анализ подобного типа рекомендуется сдавать регулярно с интервалом в каждые три месяца.

Очень важен количественный ПЦР на гепатит C для диагностики хронизации инфекционного процесса.

В этом случае врач обратит внимание на то, что все показатели выходят за пределы нормы. Исследование также рекомендуется пройти перед тем, как будет назначена противовирусная терапия, чтобы определить, насколько высока вирусная нагрузка.

Мазок Пцр количественный на хламидии и другие инфекции дает много важной информации. В первую очередь он позволяет оценить, насколько высока вирусная нагрузка на организм пациента.

Обычно чем она выше, тем тяжелее состояние больного и тем более радикальное лечение требуется для нормализации жизненных показателей. По снижению этого показателя также судят о том, насколько эффективно лечение.

Если показатель снижается, значит терапия подобрана верно и ее стоит продолжать. Если же наблюдается стабильность или повышение, стоит пересмотреть схему лечения.

Оценка эффективности лечения с помощью ПЦР анализа крови к ВИЧ и гепатитам сегодня позволяет подбирать противовирусную терапию.

И не вслепую, как это было раньше, учитывая невысокую выраженность клинических симптомов этих болезней на ранних стадиях, а целенаправленно.

Как приготовиться к обследованию Пцр количественный

Многие пациенты спрашивают у своих врачей о том, как подготовиться к сдаче биологического материала. Так, чтобы информация, полученная в результате, была наиболее полноценной и достоверной.

Диагностика методом ПЦР не требует какой-либо очень сложной подготовки, требования можно считать стандартными. Во-первых, чаще всего в качестве биологического материала сдается кровь из вены.

Поскольку кровь сдается на голодный желудок, рекомендуется попасть на анализ в утреннее время. Чтобы не вынуждать организм голодать в течение целого дня.

Дополнительные рекомендации следующие:

  • перед процедурой забора крови рекомендуется 15-20 минут отдохнуть, чтобы организм пришел в себя;
  • за 12 часов до процедуры рекомендуется ограничить: курение, употребление алкогольных напитков;
  • за 48 часов до забора материала отказываются от сексуальных контактов;
  • за 12 часов до исследования лучше не употреблять жирную пищу;
  • по рекомендации врача также возможно придется на время отказаться от некоторых медикаментов, чтобы получить достоверный результат;
  • если предполагается, что кровь будет сдавать ребенок, то ему за полчаса до процедуры рекомендуется с промежутком в несколько минут давать кипяченую воду, чтобы восполнить объем крови, который меньше, чем у взрослых.

Важно правильно подобрать клинику, где будет сдаваться анализ. Ведь ПЦР дает высокие диагностические результаты только в том случае, если используются хорошие реагенты.

И соблюдены технологии транспортировки крови в лабораторию и ряд других условий.

ПЦР количественно: особенности расшифровки

Интерпретация анализов мазков и крови может показаться простым делом, но это вовсе не так. Доверить расшифровку результатов нужно грамотному специалисту, который разбирается в заболевании.

Ведь благодаря методике можно:

  • точно определить, какова стадия инфекционного процесса;
  • узнать, эффективно ли лечение;
  • понять, нужна ли биопсия печени при гепатите.

Все эти данные может в полном объеме оценить только врач, исходя из набора медицинских знаний об особенностях течения инфекционного процесса, данных о пациенте и его состоянии здоровья.

Вирусная нагрузка, которая также оценивается в ходе этого метода диагностики, считается высокой в том случае, если количество копий патогена превышает отметку в 10 в 7 степени копий. Об очень низкой нагрузке говорит количество копий, равное 10 в 3 степени.

Есть также промежуточные значения, которые оцениваются дерматовенерологом или врачом-инфекционистом. Анализ повторяют на протяжении всего лечения. При хронических инфекциях рекомендуется регулярное выполнение диагностики с целью контроля над заболеванием.

Количественная оценка ПЦР – один из эффективных и достоверных методов, применяемых в современной медицинской практике.

Если вам необходимо сдать количественный анализ ПЦР, обращайтесь к грамотным венерологам.

Источник: https://prosifilis.ru/content/pcr-kolichestvennyy

Поделиться:
Нет комментариев

    Добавить комментарий

    Ваш e-mail не будет опубликован. Все поля обязательны для заполнения.

    ×
    Рекомендуем посмотреть